Bioresour Bioprocess
作者: 发布时间:2016-03-25 14:03:00
Bioresources and Bioprocessing 2016, 3:3
http://bioresourcesbioprocessing.springeropen.com/articles/10.1186/s40643-015-0081-5
稳定、可回收的交联酶聚合体(CLEA)-蛋白酶的制备条件优化和表征
Safa Senan Mahmod, Faridah Yusof, Mohamed Saedi Jami and Soofia Khanahmadi
Department of Biotechnology Engineering, International Islamic
University Malaysia, P.O. Box 10, Gomabak, 50728 Kuala Lumpur, Malaysia
【摘要】背景:交联酶聚合体(CLEA)技术在工业规模生产固定化生物催化剂十分有效,主要优点为:操作简单、产品稳定、成本低、省时和可再生。结果:本研究由斑点叉尾鮰的内脏制备有活性、稳定和可回收的交联酶集合体(CLEA)-蛋白酶。通过响应曲面法优化制备参数,研究了交联剂、沉淀剂和添加剂浓度等主要因素之间的相互作用。交联酶聚合体(CLEA)-蛋白酶的最佳比活为4.512 U/mg蛋白,可抵抗温度和pH等变性,保持高稳定性。研究进一步表明最高活性条件为:pH值6.8及温度45°C。此外,动力学参数由米氏模型确定,Km 和 Vmax值显示出固定化酶和非固定化酶的显著差异。六个循环后,交联酶聚合体(CLEA)-蛋白酶的活性仍有初始值的28%。结论:该研究表明此交联酶聚合体(CLEA)-蛋白酶可在工业应用中用作活性极高的生物催化剂。
Response surface plot as a function of CLEA-protease specific activity showing the interaction of a glutaraldehyde and acetone at constant BSA concentration of 0.12; b glutaraldehyde and BSA at constant acetone concentration of 45 % (v/v) c acetone and BSA, as constant glutaraldehyde concentration of 65 mM